超视计荧光质粒系列,由超视计公司的应用科学家团队精心设计序列,基于
EGFP-N1 或者 EGFP-C1 载体改造,具有表达强、定位准确的特点,适用于活
细胞超分辨成像。该系列荧光质粒在 Hela、U2OS、COS7 等常见细胞系中进行
了验证,具有较高的转染效率,可达到 60%左右,并且可转染表达后将细胞固
定成像观察。
使用说明:
a. 37℃ 预热 OptiMEM培养基。
b.观察细胞:35mm玻底皿中细胞密度约为70%~80%。
c.取出转染试剂和质粒,离心。
d.取出2支新的EP管,分别加入50μLOMEM培养基,1个管子加入1.5μL。
转染试剂,另1管加入300~500ng质粒,静置5min。
e.将旧培养基弃掉,加入1mL 新鲜OMEM。
f.将50ul转染试剂体系加入50ul质粒体系中,获得混合物,吹打混匀,然后静置20min。
g.将混合物(切记不要吹打,吸取之后直接加入细胞中)加入细胞中,轻轻混匀,放回培养箱转染6h。
h.转染6h后换液,继续培养。
i.转染24h后成像。
备注:1、可使用lipo2000或者阳离子转染试剂盒;2、质粒浓度和转染换液时间可以根据成像结果进行摸索,以达到最佳成像效果。