LAMP1-GFP

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超视计荧光质粒系列,由超视计公司的应用科学家团队精心设计序列,基于EGFP-N1或者 EGFP-C1载体改造,具有表达强、定位准确的特点,适用于活细胞超分辨成像。该系列荧光质粒在 Hela、U2OS、COS7 等常见细胞系中进行了验证,具有较高的转染效率,可达到60%左右,并且可转染表达后将细胞固定成像观察。

 

使用说明:
a. 37℃ 预热 OptiMEM培养基。

b.观察细胞:35mm玻底皿中细胞密度约为70%~80%。

c.取出转染试剂和质粒,离心。

d.取出2支新的EP管,分别加入50μLOMEM培养基,1个管子加入1.5μL。

转染试剂,另1管加入300~500ng质粒,静置5min。

e.将旧培养基弃掉,加入1mL  新鲜OMEM。

f.将50ul转染试剂体系加入50ul质粒体系中,获得混合物,吹打混匀,然后静置20min。

g.将混合物(切记不要吹打,吸取之后直接加入细胞中)加入细胞中,轻轻混匀,放回培养箱转染6h。

h.转染6h后换液,继续培养。

i.转染24h后成像。

 

备注:1、可使用lipo2000或者阳离子转染试剂盒;2、质粒浓度和转染换液时间可以根据成像结果进行摸索,以达到最佳成像效果。

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